蔗糖磷酸合成酶(SPS)測(cè)試盒

商品詳情：
蔗糖磷酸合成酶(SPS)測(cè)試盒測(cè)定意義

蔗糖不僅是重要的光合產(chǎn)物，也是植物體內(nèi)運(yùn)輸?shù)闹饕镔|(zhì)，還是碳水化合物的貯存形式之一。SPS(EC 2.4.1.14)以果糖-6-磷酸為受體，形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系統(tǒng)看作是蔗糖合成的主要途徑。

測(cè)定原理

蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸，蔗糖磷酸與間酚反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化，在480nm下有特征吸收峰，酶活力大小與顏色的深淺成正比。

需自備的的儀器和用品

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進(jìn)行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來(lái)水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

3.血清等液體：直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下：

1、血清（漿）LAP活力的計(jì)算:

單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計(jì)算：

單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：

單位的定義：每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬(wàn)。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如果測(cè)定的吸光值過(guò)高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰，因此，570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4．檢出限為100μmol/L。

基質(zhì)金屬20ELISA試劑盒 MMP20免費(fèi)代測(cè)試劑

基質(zhì)金屬17ELISA試劑盒 MMP17免費(fèi)代測(cè)試劑

基膜聚糖ELISA試劑盒 LUM免費(fèi)代測(cè)試劑

肌脂蛋白ELISA試劑盒 SLN免費(fèi)代測(cè)試劑

肌長(zhǎng)蛋白ELISA試劑盒 SSPN免費(fèi)代測(cè)試劑

肌原纖蛋白3ELISA試劑盒 FBN3免費(fèi)代測(cè)試劑

肌原纖蛋白2ELISA試劑盒 FBN2免費(fèi)代測(cè)試劑

肌原調(diào)節(jié)蛋白3ELISA試劑盒 MYOZ3免費(fèi)代測(cè)試劑

肌原調(diào)節(jié)蛋白2ELISA試劑盒 MYOZ2免費(fèi)代測(cè)試劑

肌原調(diào)節(jié)蛋白1ELISA試劑盒 MYOZ1免費(fèi)代測(cè)試劑

肌纖蛋白ELISA試劑盒 MYOC免費(fèi)代測(cè)試劑

肌微管素1ELISA試劑盒 MTM1免費(fèi)代測(cè)試劑

肌微管鈣黏附蛋白ELISA試劑盒 CDH15免費(fèi)代測(cè)試劑

肌特異性烯醇化酶ELISA試劑盒 MSE免費(fèi)代測(cè)試劑

肌糖ζELISA試劑盒 SGCζ免費(fèi)代測(cè)試劑
蔗糖磷酸合成酶(SPS)測(cè)試盒磷烯醇式丙酮羧激酶(PEPCK)測(cè)試盒/紫外比色法50T/48樣

磷脂酶A2(PLA2)測(cè)試盒/分光光度法50管/24樣

磷脂酶A2(PLA2)測(cè)試盒/微量法100T/48S

磷脂酶C(PLC)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

磷脂酶C(PLC)測(cè)試盒/微量法100T/96S

磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

磷脂酶D(PLD)測(cè)試盒/微量法100T/96S

硫代葡萄糖苷含量測(cè)試盒/分光光度法50T/24S

硫代葡萄糖苷含量測(cè)試盒/微量法100T/48S