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堿性蛋白酶測(cè)試盒

簡(jiǎn)要描述:

堿性蛋白酶測(cè)試盒是指在堿性條件下催化蛋白質(zhì)肽鍵水解的酶類,屬于絲氨蛋白酶。此外,該酶還能夠水解酯鍵、酰胺鍵,具有轉(zhuǎn)酯及轉(zhuǎn)肽的功能。該酶是主要工業(yè)用酶之一,廣泛應(yīng)用于制藥、絲綢、食品、制革等行業(yè)。

更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1048

商品詳情:
堿性蛋白酶測(cè)試盒測(cè)定意義:

AKP是指在堿性條件下催化蛋白質(zhì)肽鍵水解的酶類,屬于絲氨蛋白酶。此外,該酶還能夠水解酯鍵、酰胺鍵,具有轉(zhuǎn)酯及轉(zhuǎn)肽的功能。該酶是主要工業(yè)用酶之一,廣泛應(yīng)用于制藥、絲綢、食品、制革等行業(yè)。

貨號(hào)

規(guī)格

檢測(cè)方法

YSH3337

100管/48樣

微量法

YSH3337-1

50管/24樣

可見分光光度法

測(cè)定原理:

在堿性條件下,AKP水解酪蛋白生成酪氨;在堿性條件下,酪氨還原磷鉬酸生成鎢藍(lán);鎢藍(lán)在680nm有特征吸收峰,測(cè)定680nm吸光度增加速率,來(lái)計(jì)算AKP活性。

自備儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、0.5 mL EP管和蒸餾水。
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來(lái)水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

3.血清等液體:直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下:

1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬(wàn)。

注意事項(xiàng):

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過(guò)高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無(wú)吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4.檢出限為100μmol/L。

RAB11家族相互作用蛋白3ELISA試劑盒 RAB11FIP3免費(fèi)代測(cè)試劑

PTB結(jié)合核蛋白2ELISA試劑盒 RAVER2免費(fèi)代測(cè)試劑

Protogenin蛋白ELISA試劑盒 PRTG免費(fèi)代測(cè)試劑

Prominin2蛋白ELISA試劑盒 PROM2免費(fèi)代測(cè)試劑

Prominin1蛋白ELISA試劑盒 PROM1免費(fèi)代測(cè)試劑

Prestin蛋白ELISA試劑盒 PRES免費(fèi)代測(cè)試劑

Preptin蛋白ELISA試劑盒 Preptin免費(fèi)代測(cè)試劑

POTE錨蛋白域家族成員GELISA試劑盒 POTEG免費(fèi)代測(cè)試劑

Polycomb組環(huán)指蛋白4ELISA試劑盒 PCGF4免費(fèi)代測(cè)試劑

Polybromo1蛋白ELISA試劑盒 PBRM1免費(fèi)代測(cè)試劑

POLQ樣蛋白解旋酶ELISA試劑盒 HELQ免費(fèi)代測(cè)試劑

Pirin蛋白ELISA試劑盒 PIR免費(fèi)代測(cè)試劑

Pim-3原癌基因ELISA試劑盒 PIM3免費(fèi)代測(cè)試劑

Pim-2原癌基因ELISA試劑盒 PIM2免費(fèi)代測(cè)試劑

Pim-1原癌基因ELISA試劑盒 PIM1免費(fèi)代測(cè)試劑
堿性蛋白酶測(cè)試盒50管/48樣γ谷氨酰半連接酶(GCL)測(cè)試盒/分光光度法

100T/96Sγ谷氨酰半連接酶(GCL)測(cè)試盒/微量法

50管/48樣γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)測(cè)試盒/分光光度法

100T/96Sγ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)測(cè)試盒/微量法

50管/24樣-N-去甲基化酶(AND)測(cè)試盒/分光光度法

100管/48樣-N-去甲基化酶(AND)測(cè)試盒/微量法

50管/48樣氨基(AA)含量測(cè)試盒/分光光度法

100T/96S氨基(AA)含量測(cè)試盒/微量法

100管/96樣白蛋白(ALB)測(cè)試盒/比色法


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