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檸檬酸合酶(CS)測試盒

簡要描述:

檸檬酸合酶(CS)測試盒廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體基質(zhì)中,是三羧酸循環(huán)第一個限速酶,是三羧酸循環(huán)主要調(diào)控位點之一。

更新時間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1031

商品詳情:
檸檬酸合酶(CS)測試盒測定意義:                          

CS(EC 2.3.3.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體基質(zhì)中,是三羧酸循環(huán)第一個限速酶,是三羧酸循環(huán)主要調(diào)控位點之一。

貨號

規(guī)格

檢測方法

YSH3373

100管/48樣

微量法

YSH3373-1

50管/24樣

可見分光光度法

YSH3373-1

25管/12樣

可見分光光度法


測定原理:

CS催化乙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生檸檬酰fu酶A,進(jìn)一步水解產(chǎn)生檸檬酸;該反應(yīng)促使無色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

3.血清等液體:直接檢測。

計算公式如下:

1、血清(漿)LAP活力的計算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。

注意事項:

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個樣做預(yù)實驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4.檢出限為100μmol/L。

G抗原8ELISA試劑盒 GAGE8免費代測試劑

G抗原7ELISA試劑盒 GAGE7免費代測試劑

G抗原6ELISA試劑盒 GAGE6免費代測試劑

G抗原5ELISA試劑盒 GAGE5免費代測試劑

G抗原4ELISA試劑盒 GAGE4免費代測試劑

G抗原3ELISA試劑盒 GAGE3免費代測試劑

G抗原13ELISA試劑盒 GAGE13免費代測試劑

G抗原10ELISA試劑盒 GAGE10免費代測試劑

G抗原1ELISA試劑盒 GAGE1免費代測試劑

G底物ELISA試劑盒 GSBS免費代測試劑

G蛋白偶聯(lián)受體家族C5組成員AELISA試劑盒 GPRC5A免費代測試劑

G蛋白偶聯(lián)受體78ELISA試劑盒 GPR78免費代測試劑

G蛋白偶聯(lián)受體37ELISA試劑盒 GPR37免費代測試劑

G蛋白α抑制活性多肽3ELISA試劑盒 GNαI3免費代測試劑

G補綴FHA域血管生成因子1ELISA試劑盒 AGGF1免費代測試劑
檸檬酸合酶(CS)測試盒50管/24樣二胺氧化酶(DAO)測試盒/分光光度法

100T/48S二胺氧化酶(DAO)測試盒/微量法

50管/48樣二磷核酮糖羧化酶(Rubisco)測試盒/分光光度法

25管/24樣二磷核酮糖羧化酶(Rubisco)測試盒/分光光度法

100管/96樣二磷核酮糖羧化酶(Rubisco)測試盒/微量法

50管/24樣二氫黃酮chun還原酶(DFR)測試盒/分光光度法

100管/48樣二氫黃酮chun還原酶(DFR)測試盒/微量法

50管/24樣二糖酶測定試劑盒(蔗糖酶)/比色法

50管/24樣二糖酶測試盒(測麥芽糖)/比色法


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