溫育是ELISA試劑盒測(cè)定中影響測(cè)定成敗zui為關(guān)鍵的一個(gè)因素。
溫育所需時(shí)間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時(shí)間相對(duì)較短。zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。 溫育這一步是臨ELISA 測(cè)定中zui容易出現(xiàn)問題的步驟。通常目前國內(nèi) ELISA 商品試劑盒的反應(yīng)溫育時(shí)間為37℃ 30分鐘~1小時(shí), 則通常為37℃ 1~2小時(shí)才能有較*的結(jié)合,低于1小時(shí),可能會(huì)影響測(cè)定下限。
操作注意事項(xiàng)
1、要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時(shí)間 一般來說,加完樣本和(或)反應(yīng)試劑后,將 微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時(shí),孔內(nèi)溫度從室溫升37℃,需要一定的時(shí)間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時(shí)間可能還比較長,而在臨床實(shí)驗(yàn)室中,很少有天 室內(nèi)溫度較低有關(guān),此時(shí)微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37℃溫育時(shí)間不夠,以致弱陽性樣本測(cè)定為陰性。
2、溫育溫度的選擇 在有的ELISA試劑盒的說明書中,指出溫育溫度可有兩種,例如,一種是37℃下1h,另一種則為43℃下45min。因此,我們建議在臨床 ELISA 測(cè)定中盡量使用較低溫育溫度較長反應(yīng)時(shí)間的條件。
3、在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)測(cè)定中,將板從室溫(通常在25℃左右)臵于37℃溫箱, 板孔升溫時(shí),在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學(xué)梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時(shí),將板和溶液均加。
20mg/支 毛蕊異黃酮苷 Calycosin-7-O-β-D-glucoside 毛蕊異黃酮-7-O-葡萄糖苷;毛蕊異黃酮葡萄糖苷 20633-67-4
20mg/支 京尼平 Genipin 6902-77-8
10mg/支 黃柏堿 Phellodendrine 6873-13-8
20mg/支 朝藿定A1 Epimedin A1 分子式:C39H50O20
分子量:838.80
20mg/支 楊梅苷 Myricetrin 楊梅甙; 五羥基黃酮-3-鼠李糖苷 17912-87-7
20mg/支 人參皂苷Ro Ginsenoside Ro 竹節(jié)參苷V 34367-04-9
20mg/支 灰氈毛忍冬皂苷乙 Macranthoidin B 136849-88-2
20mg/支 銀杏內(nèi)酯J Ginkgolide J 白果苦內(nèi)酯J 107438-79-9
20mg/支 特女貞苷 Specnuezhenide 39011-92-2
20mg/支 京尼平苷酸 Geniposidic acid 梔子酸 27741-01-1
20mg/支 川續(xù)斷皂苷乙 Dipsacoside B 33289-85-9
20mg/支 表告依春 Epigoitrin (R)-5-乙烯基-2-惡唑啉硫酮 1072-93-1
20mg/支 大車前苷 Plantamajoside 104777-68-6
20mg/支 8-O-乙酰山梔苷甲酯 8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester 57420-46-9
10mg/支 水晶蘭苷 Monotropein 水晶蘭甙 5945-50-6
20mg/支 黃杞苷 Engeletin 572-31-6
10mg/支 巴豆苷 Crotonoside 異鳥苷 1818-71-9
ELISA試劑盒 10mg/支 沙苑子苷A Complanatoside A 146501-37-3
20mg/支 穗花杉雙黃酮 Amentoflavone 阿曼托黃酮 1617-53-4
20mg/支 土荊皮乙酸 Pseudolaric Acid B 土荊乙酸; 土槿皮乙酸 82508-31-4
10mg/支 去甲異波爾定 Norisoboldine 去甲基異波爾定 23599-69-1
20mg/支 鹽酸益母草堿 Leonurine hydrochloride 24697-74-3