Ⅰ. 利用干擾實(shí)驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是否檢測(cè)目的抗原,方法如下:
(1)將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測(cè)抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵
育液
(2)37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測(cè)抗體
(3)后續(xù)操作按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物
(4)實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測(cè)其標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),如果標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)良好則說(shuō)明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑
盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(5)如果標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)線(xiàn)性,則說(shuō)明試劑盒檢測(cè)抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實(shí)際試劑盒抗體的
檢測(cè)作用,則該試劑盒檢測(cè)抗體針對(duì)的是目的抗原。
Ⅱ.如果購(gòu)買(mǎi)了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實(shí)驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:
(1) 取出購(gòu)買(mǎi)的試劑盒A的包被板兩條。
(2) 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
(3) 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
(4) 后續(xù)操作按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,加檢測(cè)抗體、酶復(fù)合物和底物。
(5) 實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測(cè)兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的同一個(gè)指標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(6) 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)不一致則說(shuō)明兩個(gè)ELISA試劑盒檢測(cè)的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測(cè)A,不能檢測(cè)
B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。