實(shí)驗(yàn)原理elisa競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)抗-HBe(快速法)
實(shí)驗(yàn)原理
用抗-HBe包被固相載體后,同時(shí)加被檢血清和合適滴度中和試劑HBeAg,若被檢血清中含有抗-HBe,則與包被抗-HBe競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合HBeAg,被檢標(biāo)本中抗-HBe越多,HBeAg被結(jié)合越多,而與包被抗-HBe結(jié)合就越少,加底物后顯色就越淺;反之越深。
主要試劑與器材
elisa試劑盒:內(nèi)含已包被抗-HBe板條、HRP-抗HBe溶液、中和試劑HBeAg溶液、陽(yáng)性和陰性對(duì)照血清,底物溶液(A液、B液)、終止液、洗滌液。
操作步驟
1.加樣:取出干包板條,按編號(hào)順序分別加50μl待檢血清、陰性對(duì)照血清和陽(yáng)性對(duì)照血清于相應(yīng)孔中。設(shè)空白對(duì)照孔,除此孔外,每孔加HBeAg50μl、HRP-抗HBe50μl,振蕩混勻后,置43℃(或37℃)溫育1h。
2.洗滌:甩去孔內(nèi)液體,用洗滌液注滿各孔,靜置20s,甩干。如此重復(fù)洗滌4次,在吸水紙上拍干。
3.顯色:每孔加顯色劑A、顯色劑B各50μl,振蕩混勻后置37℃避光顯色10-15min。
4.終止:每孔加終止液50μl,振蕩混勻。
5.酶標(biāo)儀檢測(cè):選用450nm波長(zhǎng),用空白孔調(diào)零之后測(cè)各孔OD值。
結(jié)果分析
P/N≤0.3為陽(yáng)性。P/N>0.3為陰性。
P/N=待檢血清OD值/陰性對(duì)照OD值。
注意事項(xiàng)
1.試劑置2-4℃保存。取用時(shí)應(yīng)先置室溫平衡。干包被板條須密封防潮,凍存,取用后余者及時(shí)封存。
2.恰當(dāng)選好HBeAg的濃度。
3.試劑用前應(yīng)搖勻。
Rat anti-Monocyte antibody,AMA ELISA試劑盒 大鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat anti-myelin associated glycoprotein antibody,MAG Ab ELISA試劑盒 大鼠抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat Anti-myocardial antibody,AMA ELISA試劑盒 大鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat anti-red cell antibody ELISA試劑盒 大鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat Anti-Smooth Muscle Antibody,ASMA ELISA試劑盒 大鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat anti-sperm antibody,AsAb ELISA試劑盒 大鼠抗精子抗體(AsAb)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat Anti-Thrombin Ⅲ,AT-Ⅲ ELISA試劑盒 大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat anti-thrombin receptor,ATR ELISA試劑盒 大鼠抗凝血酶受體(ATR)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat Anti-thyroid-globulin antibody,ATGA/TGAB ELISA試劑盒 大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat anti-Thyroid-Peroxidase antibody,TPO-Ab ELISA試劑盒 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat Anti-trypsin,AT ELISA試劑盒 大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat apelin 12,AP12 ELISA試劑盒 大鼠apelin 12(AP12)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat Apolipoprotein E,Apo-E ELISA試劑盒 大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat Apolipoprotein H,Apo-H ELISA試劑盒 大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat apoprotein A1,apo-A1 ELISA試劑盒 大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T
Rat apoprotein B100,apo-B100 ELISA試劑盒 大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 規(guī)格: 96T/48T