培養(yǎng)基中的碳、氮比例很重要。若培養(yǎng)基中碳源供應不足時,易引起菌種的過早衰老和自溶;若氮源過多或過少,則會引起菌絲過于旺盛生長或生長緩慢,對菌種培養(yǎng)不利。菌種培養(yǎng)基中的pH值也是影響菌絲生長的重要因素。一般培養(yǎng)基經(jīng)高壓滅菌后會使pH值有所下降,必須經(jīng)檢驗后加以調(diào)整。調(diào)節(jié)pH值時,可用石灰澄清液,也可用氫氧化鈉或鹽酸。在配制培養(yǎng)基時,為了避免沉淀物的生成而造成營養(yǎng)物的損失,應掌握加入各種營養(yǎng)物的順序。一般應先加入緩沖化合物,溶解后加入主要元素,然后是微量元素,zui后加入維生素等,是前一種營養(yǎng)成份溶解后再加入第二種營養(yǎng)成份。此外,培養(yǎng)基加入糖類時,應采用適當?shù)臏缇椒?,因葡萄糖在高壓下易被破壞,多糖和雙糖也因高溫易被水解和變質(zhì)。
培養(yǎng)基菌種的選擇和鑒定方法討論:
1.待鑒定的培養(yǎng)基菌種一定是純種
如果菌種不純,所觀察到的現(xiàn)象則是混合現(xiàn)象,這樣自然不會得到正確的結(jié)果。因此在鑒定之前,首先要將菌種純化。純化方法,一般有2種:平板劃線單菌落分離法和單細胞分離法。前一種操作簡便,效果良好,適用范圍廣。
2.選一本比較好的培養(yǎng)基鑒定手冊
鑒定時以此手冊為標準,開展鑒定工作。根據(jù)多數(shù)人的經(jīng)驗,我們認為在細菌鑒定方面,使用《伯杰氏鑒定細菌學手冊》一書較為合適。在具體鑒定時,可參看*微生物研究所細菌分類組編著的《一般細菌常用鑒定方法》一書。在放線菌鑒定方面,可以參看中科院微生物研究所編著的《鏈霉菌鑒定手冊》(1975年)一書。真菌的鑒定可參看中科院微生物研究所編著的《常見與常用真菌》(1973年)一書。荷蘭羅德的《酵母的分類研究》(1970年)一書,對酵母菌的分類有很大的實用價值。
3.要有合適的培養(yǎng)基鑒定方法
微生物種類繁多,特征各異,性狀有主次之分。因此,在鑒定某種微生物時,要選用合適的鑒定方法,確定主要的測試項目。例如,鑒定的微生物若是霉菌,則菌落形態(tài)觀察十分重要;若是酵母菌,有性繁殖的方式、特征以及生理生化特征中的糖的發(fā)酵和同化,硝酸鹽的同化就是主要指標。