技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 熒光定量PCR試劑盒的特征及注意事項(xiàng)
熒光定量PCR試劑盒的特征及注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2022-01-14   點(diǎn)擊次數(shù):594次
  熒光定量PCR試劑盒的特征及注意事項(xiàng)
  一、熒光定量PCR試劑盒的特征:
  1、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒靈敏度高:能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
  2、特異性強(qiáng):采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制,抑制非特異性擴(kuò)增。
  3、重復(fù)性好:擴(kuò)增曲線重合度高,受干擾影響少。
  4、擴(kuò)增效率高:擴(kuò)增曲線Ct值低,起峰快,效率高。
  5、所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
  二、熒光定量PCR試劑盒的注意事項(xiàng):
  請(qǐng)務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng)。
  1、溶液P1在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA全部加入),混勻,置于標(biāo)準(zhǔn)溫度保存。
  2、使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明先在漂洗液PW中加入無(wú)水乙醇。
  3、使用前請(qǐng)先檢查平衡液BL、溶液是否出現(xiàn)渾濁,如有混濁現(xiàn)象,可在標(biāo)準(zhǔn)水浴中加熱幾分鐘,即可恢復(fù)澄清。
  4、注意不要直接接觸溶液,使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子。
  5、所有離心步驟均為使用常規(guī)臺(tái)式離心機(jī)室溫下進(jìn)行離心,速度為標(biāo)準(zhǔn)。
  6、提取的質(zhì)粒量與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、質(zhì)??截悢?shù)等因素有關(guān)。
  7、實(shí)驗(yàn)前使用平衡液BL處理吸附柱,可以較大限度激活硅基質(zhì)膜,提高得率。
  8、用平衡液BL處理過的柱子當(dāng)天使用,放置時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)影響效果。
  總結(jié):熒光定量PCR試劑盒的特征及注意事項(xiàng),看完本文您就應(yīng)該有了基本的認(rèn)識(shí)和了解相信大家都明白了吧!總的來說,希望對(duì)大家有所幫助。
 

化工儀器網(wǎng)

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站