熒光PCR法是如何進(jìn)行核酸檢測的?
PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室,實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是DNA定量技術(shù)的一次飛躍,是用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng),能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,其精確度高達(dá)納米級(jí)別。而熒光PCR法則是實(shí)現(xiàn)該項(xiàng)技術(shù)的載體,通過將病毒體內(nèi)所含的基因進(jìn)行擴(kuò)增的方法,測出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。
PCR實(shí)驗(yàn)室其實(shí)功能極其強(qiáng)大,定性分析和定量檢測是它最大的兩個(gè)應(yīng)用方向,在核酸檢測方面的應(yīng)用尤其突出,接下來德晟就給大家介紹一下PCR在病原體測定方面的應(yīng)用,也希望通過這些示例可以讓大家更清楚核酸檢測的流程是怎樣的。
示例:病毒核酸檢測。
方法學(xué):熒光PCR法。
用途:用于體外定性檢測病毒感染的肺炎疑似病例、疑似聚集性病例患者、其他需要進(jìn)行病毒感染診斷或鑒別。
檢測基因:病毒(2019-nCoV)ORFlab和N基因、E基因。
標(biāo)本類型:上呼吸道標(biāo)本:咽拭子、鼻拭子;下呼吸道標(biāo)本:呼吸道抽取物、肺泡灌洗液樣本、肺組織活檢標(biāo)本。
檢測流程:
?。?)核酸檢測前的生物安全防護(hù)(工作人員個(gè)人三級(jí)防護(hù)的穿戴)→(2)樣本的滅活(56℃滅活30分鐘)→(3)樣本的核酸提?。ㄊ止?、核酸提取儀)→(4)PCR體系的配制和模板加樣→(5)上機(jī)檢測及結(jié)果分析→(6)檢測后的消毒。
其他病原體檢測:HIV、甲乙丙肝、HPV、肺支、肺衣、EB病毒、腺病毒、胞病毒、甲乙流、埃博拉病毒、B族鏈球菌。
適合開展的醫(yī)院和科室:兒童醫(yī)院、婦幼、兒檢所、第三方、各種級(jí)別的有需求的醫(yī)院。
PCR技術(shù)的問世使病原體檢測能夠快速、方便地進(jìn)行。PCR檢測方法具有靈敏度高、特異性高、快捷、對(duì)樣品要求低等優(yōu)點(diǎn),因此被臨床醫(yī)生廣為認(rèn)可,已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測部門的禽疫病診斷。