人ELISA試劑盒中zui為常用的標本是血漿或血清,有時由于特定的檢測項目,也常用到尿液、唾液、糞便等標本。目前血漿血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞因子和治療藥物等。在收集處理和保存上要注意下面幾點:
1.要注意避免出現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA試劑盒測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。
2.要注意樣本的采集及血清分離中要盡量避免細菌污染,這是因為細菌的生長,所分泌的一些酶可能會對抗體抗原蛋白產生分解作用;有些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身就會對用相應酶作標記的方法測定產生非特異性干擾。
3.血清標本應該以無菌操作分離,可以在2~8℃下保存一周,樣本的長時間保存,要在-70℃保存。如為有菌操作,則建議冰凍保存