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新ELISA試劑盒SCI文章試劑配制研究方法
更新時間:2018-06-07   點擊次數(shù):1295次

完整的ELISA試劑盒SCI文章包含以下各組分:已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物);ELISA試劑盒酶的底物;陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考尺度品和控制血清(定量測定中);酶聯(lián)物(結(jié)合物)及標本的稀釋液;洗滌液;酶反應終止液。ELISA中有三個必要的試劑:免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等。
    疫吸附劑已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2~8℃)干燥的前提下一般可保留6個月以上??勺鱁LISA中載體的材料良多,zui常用的是聚苯乙烯。ELISA試劑盒以含鐵的磁性微粒作為ELISA固相載體,反應后用磁鐵的吸引進行分離,洗滌利便,ELISA試劑盒一般均配以特殊儀器。為比較不同固相在某一ELISA測定中的優(yōu)劣,可應用如下的試驗:用其他免疫學測定方法選出一個典型的陽性標本和陰性標本,將它們進行一系列稀釋后,在不同的固相載體上按預定的ELISA操縱步驟進行測定,然后比較結(jié)果。小試管還可以當作比色杯,ELISA試劑盒zui后直接放入分光光度計中比色。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用,包被在固相上的抗原純度大大進步,因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕捉包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復性亦佳。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質(zhì)的機能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍留存原來的免疫學活性,加之它的價格低廉,所以被普遍采用。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用力??刂品磻疤幔垢骺鬃x數(shù)在吸光度0.8左右。所有單個讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差,應小于10%。例如,在檢測抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。ELISA試劑盒SCI文章板的特點是可以同時進行大量標本的檢測,并可在特制的比色計上迅速讀出結(jié)果。換言之,包被等于抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。在哪一種載體上陽性結(jié)果與陰性結(jié)果差別zui大,這種載體就是這一ELISA測定項目的zui合適的固相載體。

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